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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC1285 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Diamine oxidase (DAO) test kit |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品名稱：二胺氧化酶活性檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品英文名： Micro Diamine Oxidase (DAO) Assay Kit
產(chǎn)品貨號：BC1285 產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：1680
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字：二胺氧化酶試劑盒
簡要介紹：
DAO 催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰 聯(lián)茴香胺生成氧化型鄰聯(lián)茴香胺，在 460nm 處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加 速率，計(jì)算 DAO 活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
| 商品貨號： | 商品品牌： | 規(guī)格 | 基本售價： | 選擇規(guī)格 |
| BC1285-100管/48樣 | Solarbio | 100管/48樣 | 1680.00元 |  |
測定意義:
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物（腸粘膜、肺、*、*等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān)，能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。
測定原理:
DAO 催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰 聯(lián)茴香胺生成氧化型鄰聯(lián)茴香胺，在 460nm 處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加 速率，計(jì)算 DAO 活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 0.25mL×1 支，4℃保存。
試劑二：液體 2mL×1 管，4℃保存。
試劑三：液體 1mL×1 管，4℃保存。
粗酶液提取
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1mL 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 20min，取上清，置冰上待測。 2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建 議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。
測定操作表
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 460nm，蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
| 對照管 | 測定管 | |
| 粗酶液（μL） | 50 | 50 |
| 提取液（μL） | 128 | 108 |
| 試劑一（μL） | 2 | 2 |
| 試劑二（μL） | 20 | 20 |
| 試劑三（μL） | 20 | |
| 混勻，37℃水浴 30min，微量石英比色皿/96 孔板，蒸餾水調(diào)零，測定 460nm 吸光值。ΔA=A 測定-A 對照。 | ||
酶活性計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO 活性（nmol/min/mg prot）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr （2）按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2所需 的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO 活性（nmol/min/g）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）÷T= 18×A460÷W （3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每 104 個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO 活性（nmol/min/104 cell）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量）÷T= 18×A460÷ 細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 所 需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO 活性（nmol/min/mL）= d A e ′ 460 ×V 反總÷V 樣÷T= 18×A460 ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；
V 反總：反 應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.05mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr： 樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，30min
b. 用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO 活性（nmol/min/mg prot）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr （2）按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2所需 的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO 活性（nmol/min/g）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）÷T= 36×A460÷W （3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每 104 個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO 活性（nmol/min/104 cell）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量）÷T= 36×A460÷ 細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol H2O2 所 需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO 活性（nmol/min/mL）= d A e ′ 460 ×V 反總÷V 樣÷T= 36×A460 ε ：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L /mmol/cm；d：96 孔板光徑，0.5cm；
V 反總： 反應(yīng)總體積，0.2mL；V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.05mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL； Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，30min
注意事項(xiàng)：
1、如果 OD 值小于 0.01，適當(dāng)加大提取用樣本量；OD 值大于 0.8，粗酶液可適當(dāng)稀釋，或 者減少提取用樣本量。
2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測定。
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