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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC1635 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Micro?Laccase Assay Kit |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：1620
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 漆酶檢測試劑盒|漆酶活性檢測試劑盒|漆酶|試劑盒
簡要介紹：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解產(chǎn)物ABTS 產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定ABTS 自由基的增長速率，可計算得漆酶的活性。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前加15mL 試劑一溶解。
產(chǎn)品說明：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高
等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解
以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解產(chǎn)物ABTS 產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定
ABTS 自由基的增長速率，可計算得漆酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟：
酶液提取
細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500-1000:1 的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率30％或300W，超聲3s，間隔7s，總時間3min），12000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（ml）為1:5-10 的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿；10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
培養(yǎng)液：直接待檢。
測定操作表
酶活性計算公式：
| 對照管 | 測定管 | |
| 樣本（mL） | 0.1 | |
| 煮沸樣本（mL） | 0.1 | |
| 工作液（mL） | 0.6 | 0.6 |
| 60℃，3min，測定420nm 處吸光值A，△A=A 測定管-A 對照管 | ||
按照蛋白濃度計算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/mg prot）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×Cpr)÷T= 65×△A÷Cpr
按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/g）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×W)÷T= 65×△A÷W
按照細胞數(shù)量計算
酶活性定義：每104個細胞每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/104 cell）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×細胞數(shù)量÷V樣總)÷T= 65×△A÷細胞數(shù)量
按照液體體積計算
酶活性定義：每104個細胞每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/L）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷V 樣÷T= 65000×△A
ε：ABTS 毫摩爾消光系數(shù)；36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.7mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.1mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T:反應(yīng)時間，3min
注意事項：
工作液需臨用前配制，并且盡快使用，4℃保存一周，若變色則不能使用。
測定之前進行預(yù)實驗，若吸光值較高，請將樣品用提取液?行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
